色譜法又叫層析法,它是一種物理分離技術。它的分離原理是使混合物中各組分在兩相間進行分配,其中一相是不動的,叫做固定相,另一相則是推動混合物流過此固定相的流體,叫做流動相。當流動相中所含的混合物經過固定相時,就會與固定相發生相互作用。由于各組分在性質與結構上的不同,相互作用的大小強弱也有差異。因此在同一推動力作用下,不同組分在固定相中的滯留時間有長有短,從而按先后秩序從固定相中流出,這種借在兩相分配原理而使混合物中各組分獲得分離的技術,稱為色譜分離技術或色譜法。當用液體作為流動相時,稱為液相色譜儀,當用氣體作為流動相時,稱為氣相色譜儀。
色譜法具有:
分離效能高;分析速度快;樣品用量少;靈敏度高;適用范圍廣等許多化學分析法無可與之比擬的優點。
當載氣攜帶著不同物質的混合樣品通過色譜柱時,氣相中的物質一部分就要溶解或吸附到固定相內,隨著固定相中物質分子的增加,從固定相揮發到氣相中的試樣物質分子也逐漸增加,也就是說,試樣中各物質分子在兩相中進行分配,最后達到平衡。這種物質在兩相之間發生的溶解和揮發的過程,稱分配過程。分配達到平衡時,物質在兩相中的濃度比稱分配系數,也叫平衡常數,以K表示,K=物質在固定相中的濃度/物質在流動相中的濃度,在恒定的溫度下,分配系數K是個常數。
由此可見,氣相色譜的分離原理是利用不同物質在兩相間具有不同的分配系數,當兩相作相對運動時,試樣的各組分就在兩相中經反復多次地分配,使得原來分配系數只有微小差別的各組分產生很大的分離效果,從而將各組分分離開來。然后再進入檢測器對各組分進行鑒定。